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基質輔助激光解吸-飛行時間質譜儀(MALDI-TOF-MS)

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基質輔助激光解吸-飛行時間質譜儀(MALDI-TOF-MS)

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項目介紹

MALDI-TOF是近年來發展起來的一種軟電離新型有機質譜,依據樣品的質荷比(m/z)的不同來進行檢測,并測得樣品分子的分子量。

依據測試結果分為:低分辨和高分辨,低分辨精確到小數點后1位,高分辨精確到小數點后4位。

測試模式:有線性模式和反射模式,線性模式適合大分子(如蛋白質,核算,多聚物等),此模式分辨率和質量準確度低于反射模式,通常測得的為平均分子量。反射模式適合分子量<5000Da的物質,如多肽,寡糖等,該模式分辨率高,可準確測得單同位素分子量。模式下面又分為:正離子和負離子模式,分子結構不同,有的更容易帶正電,有的更容易帶負電,正離子看的是帶正電的離子,負離子看的是帶負電的離子。常規是正離子模式。

樣品要求

1.可測樣品:蛋白質、核酸、多肽、大分子、有機小分子等,可為粉末、液體樣品,樣品盡量不要含有鹽;

2.粉末樣品5-10mg,在合適的溶劑中溶解性良好或者分散,實驗室現有溶劑為水、甲醇、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、四氫呋喃、丙酮、乙醚、甲苯等;

3.液體樣品:2mL,需要備注液體樣品的具體濃度(一般要求不低于1mg/mL),以及緩沖液的成分。

項目案例
常見問題
1、低分辨和高分辨的區別,分別能到多少數量級?

答:高分辨與低分辨區別在于得到數據的精準度,低分辨只能到整數級,分辨率高的儀器,峰分離效果好,可以得到準確的質荷比,其實就是得到碎片的分子式,有利于解析,而低分辨率質譜卻做不到。

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