国产主播欧美精品,在线视频cao,中文字幕免费一区二区,日韩三级影视

預(yù)存
Document
當前位置：文庫百科 ? 文章詳情
哪種類型的凝膠適合做WB實驗？
來源： 時間：2024-10-12 09:32:59 瀏覽：3070次

哪種類型的凝膠適合做WB實驗？

 

Western blotting（WB）實驗是一種用于檢測特定蛋白質(zhì)在樣品中的存在、表達水平及分子量的技術(shù)；在WB實驗中，凝膠電泳是關(guān)鍵步驟之一，它用于分離蛋白質(zhì)混合物中的不同蛋白質(zhì)。

適合做WB實驗的凝膠類型：

適合做WB實驗的凝膠主要有兩種類型：聚丙烯酰胺凝膠（Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE）和瓊脂糖凝膠（Agarose Gel Electrophoresis）；在WB實驗中，最常用的是聚丙烯酰胺凝膠，尤其是SDS-PAGE凝膠。

一、SDS-PAGE凝膠

SDS-PAGE凝膠是一種含有十二烷基硫酸鈉（SDS）的聚丙烯酰胺凝膠，非常適合用于WB實驗。

1. 特點

（1）分離效果良好：SDS-PAGE凝膠能夠根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量進行有效分離，分離范圍廣泛，從幾kDa到數(shù)百kDa的蛋白質(zhì)均可分離。

（2）均一性：SDS是一種去污劑，能夠使蛋白質(zhì)變性并帶上負電荷，從而在電場中根據(jù)分子量大小進行遷移，保證了蛋白質(zhì)分離的均一性。

（3）適用于多種蛋白質(zhì)：SDS-PAGE凝膠適用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的分離，包括酶、抗體、受體等。

（4）操作簡便：制備SDS-PAGE凝膠的過程相對簡單，實驗室人員易于掌握。

2. 適用性

（1）蛋白質(zhì)分子量測定：SDS-PAGE凝膠可用于蛋白質(zhì)分子量的準確測定。

（2）蛋白質(zhì)純化：在WB實驗中，SDS-PAGE凝膠可用于初步純化蛋白質(zhì)，以便于后續(xù)的轉(zhuǎn)移和檢測。

二、瓊脂糖凝膠

瓊脂糖凝膠通常用于大分子量蛋白質(zhì)的分離，但在WB實驗中較少使用，以下是其特點：

1. 特點

（1）孔徑較大：瓊脂糖凝膠的孔徑較大，適用于分離大分子量蛋白質(zhì)，如蛋白質(zhì)復(fù)合物。

（2）分辨率較低：相較于SDS-PAGE凝膠，瓊脂糖凝膠的分辨率較低，不適合分離小分子量蛋白質(zhì)。

2. 適用性：瓊脂糖凝膠在WB實驗中的應(yīng)用較少，主要用于大分子量蛋白質(zhì)的初步分離或質(zhì)粒DNA的分離。

三、選擇適合WB實驗的凝膠類型

在選擇適合WB實驗的凝膠時，以下因素需要考慮：

1. 蛋白質(zhì)分子量：對于小分子量蛋白質(zhì)，選擇低濃度SDS-PAGE凝膠；對于大分子量蛋白質(zhì)，選擇高濃度SDS-PAGE凝膠。

2. 凝膠濃度：凝膠的濃度會影響蛋白質(zhì)的分離效果。一般而言，5%-20%的凝膠濃度適用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的分離。

3. 凝膠尺寸：根據(jù)實驗需求選擇合適的凝膠尺寸，如微型凝膠、小型凝膠等。

4. 凝膠類型：對于WB實驗，優(yōu)先選擇SDS-PAGE凝膠，因其分離效果更好，更適合后續(xù)的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和檢測。

四、凝膠制備注意事項

1. 精確配比：在制備凝膠時，需嚴格按照配方比例進行配比，以確保凝膠的穩(wěn)定性和分離效果。

2. 去除氣泡：在凝膠聚合過程中，需確保無氣泡產(chǎn)生，以免影響電泳效果。

3. 安全操作：聚丙烯酰胺凝膠的制備過程中需使用丙烯酰胺和N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺，這些化學品具有毒性，操作時應(yīng)注意安全。

評論 / 文明上網(wǎng)理性發(fā)言
12條評論
全部評論 / 我的評論
最熱 /  最新
全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字，很多小語種，有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
點贊12
回復(fù)
全部
查看更多評論
相關(guān)文章

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應(yīng)用技術(shù)

2023-10-08

熱重分析（TG-DTG）曲線的幾種解析方法

2023-12-26

接觸角測試（CA）的原理、樣品制備要求及實際應(yīng)用

2023-11-16

一文詳細介紹he染色的基本原理、實驗步驟及注意事項

2023-11-23

恒電流間歇滴定法GITT的基本原理以及測試教程

2022-08-12

TMA技術(shù)的基本概念、應(yīng)用領(lǐng)域以及實際操作中的要點

2023-12-06

項目推薦/Project
蛋白印跡實驗（WB）

蛋白印跡實驗（WB）

熱門文章/popular

基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu)）

晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程（下篇）

手把手教你用ChemDraw 畫化學結(jié)構(gòu)式：基礎(chǔ)篇

【科研干貨】電化學表征：循環(huán)伏安法詳解（上）

電化學實驗基礎(chǔ)之電化學工作站篇 （二）三電極和兩電極體系的搭建 和測試

【科研干貨】電化學表征：循環(huán)伏安法詳解（下）

微信掃碼分享文章
主站蜘蛛池模板： 确山县| 江陵县| 子长县| 柳河县| 高雄县| 荃湾区| 义马市| 黄陵县| 抚州市| 望城县| 米林县| 西华县| 门源| 江津市| 绥宁县| 彭泽县| 印江| 荣昌县| 巴青县| 景德镇市| 雅江县| 宁南县| 永清县| 大埔区| 友谊县| 民县| 板桥市| 安多县| 元阳县| 和林格尔县| 太保市| 金堂县| 耒阳市| 南岸区| 新晃| 剑河县| 白玉县| 桦川县| 博客| 观塘区| 湘阴县|