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穩態瞬態熒光光譜 （PL）
來源：鑠思百材料分析檢測 時間：2022-10-11 14:13:26 瀏覽：7707次

1.什么是熒光

物體經過較短波長的光照，把能量儲存起來，然后緩慢發出較長波長的光，發出的這種光就叫熒光。

2.什么是熒光光譜

任何熒光化合物都具有兩個特征光譜：激發光譜和發射光譜。激發光譜反映了某一固定的發射波長下所測量的熒光強度對激發波長的依賴關系；發射光譜反映了某一固定激發波長下所測量的熒光的波長分布。

圖為：室溫下菲的乙醇溶液的激發光譜和熒(磷)光光譜

熒光光譜能夠提供激發譜、發射譜、峰位、峰強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振度等信息，熒光分析定性和定量的基礎。

3.什么是熒光壽命？

熒光物質具有兩個重要的發光參數：熒光壽命和熒光量子產率。熒光壽命（τ）是指當激發停止后，分子的熒光強度降到激發時最大強度的1/e所需的時間，它表示粒子在激發態存在的平均時間，通常稱為激發態的熒光壽命。與穩態熒光提供一個平均信號不同，熒光壽命提供的是激發態分子的信息，前者可以告訴你事情發生了，而后者可以告訴你為什么發生。

熒光壽命與物質所處微環境的極性、黏度等有關，可以通過熒光壽命分析直接了解所研究體系發生的變化。熒光現象多發生在納秒級，這正好是分子運動所發生的的時間尺度，因此利用熒光技術可以“看”到許多復雜的分子間作用過程，例如超分子體系中分子間的簇集、固液界面上吸附態高分子的構象重排、蛋白質高級結構的變化等。

4.什么是熒光量子產率？

熒光量子產率（φf）是熒光物質另一個基本參數，它表示物質發生熒光的能力，數值在0~1之間。熒光量子效率是熒光輻射與其他輻射和非輻射躍遷競爭的結果。

式中， kf為熒光發射過程的速率常數， ∑ki為其他有關過程的速率常數總和。一般來說， kf主要決定于化學結構，而 ∑ki主要決定于化學環境，同時也與化學結構有關。

5.什么是熒光分析？

熒光分析就是基于物質的光致發光現象而產生的熒光的特性及其強度進行物質的定性和定量的分析方法。目前，也廣泛地作為一種表征技術來研究體系的物理、化學性質及其變化情況，例如生物大分子構象及性質的研究。

熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據樣品分別選配石英池（液體樣品）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）。

熒光光譜分析可與顯微鏡耦合，獲得微區分析結果。熒光是無損傷、非接觸的分析技術，還可用于自動檢驗、批量篩分、遠程原位分析和活體分析。

熒光分析的優點：

（1）靈敏度高；

（2）選擇性強；

（3）試樣量少、方法簡單；

（4）提供較多的物理參數。但是也存在應用范圍不夠廣泛、對環境敏感（干擾因素多）等缺點。

6.熒光光譜定性分析依據？

不同結構熒光化合物都有特征的激發光譜和發射光譜，因此可以將熒光物質的激發光譜與發射光譜的形狀、峰位與標準溶液的光譜圖進行比較，從而達到定性分析的目的。

7.熒光光譜定量分析原理？

在低濃度時，溶液的熒光強度與熒光物質的濃度成正比：F=Kc。其中，F為熒光強度，c為熒光物質濃度，K為比例系數。這就是熒光光譜定量分析的依據。

上述關系不適用于熒光物質濃度過高時，熒光物質濃度過高，其熒光強度反而降低。原因有：

（1）內濾效應。一是，當溶液濃度過高時，溶液中雜質對入射光的吸收作用增大，相當于降低了激發光的強度。二是，濃度過高時，入射光被液池前部的熒光物質強烈吸收，處于液池中、后部的熒光物質，則因受到入射光大大減弱而使熒光強度大大降低；而儀器的探測窗口通常對準液池中部，從而導致檢測到的熒光強度大大降低。

（2）相互作用。較高濃度溶液中，可發生溶質間的相互作用，產生熒光物質的激發態分子與其基態分子的二聚物或其他溶質分子的復合物，從而導致熒光光譜的改變和/或熒光強度下降。當濃度更大時，甚至會形成熒光物質的基態分子聚集體，導致熒光強度更嚴重下降。

（3）自淬滅。熒光物質的發射光譜與其吸收光譜呈現重疊，便可能發生所發射的熒光被部分再吸收的現象，導致熒光強度下降。溶液濃度增大時會促使再吸收現象加劇。

當然，熒光強度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等，在定量分析中需要加以考慮。

熒光光譜定量分析的計算與其他光譜類似，包括標準曲線法、比例法等。

8.熒光光譜的應用領域？

熒光光譜已應用于很多不同領域，特別是需要無損、顯微、化學分析、成像分析的場合。無論是需要定性還是定量的數據，熒光分析都能快速、簡便地提供重要信息。

來源：鑠思百材料分析檢測

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全部 3小時前 四川
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