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關(guān)于色譜的重現(xiàn)性、重復(fù)性問題該是豁然開朗的時(shí)候了！

來源：實(shí)驗(yàn)與分析時(shí)間：2015-04-20 22:50:14 瀏覽：4309次

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關(guān)于色譜的重現(xiàn)性、重復(fù)性問題該是豁然開朗的時(shí)候了！

很多實(shí)驗(yàn)室分析人員在面對(duì)精確度、重現(xiàn)性、重復(fù)性這些定義的時(shí)候都會(huì)犯迷糊，到底重復(fù)性、重現(xiàn)性該如何區(qū)分?今天以后就沒理由再傻傻分不清楚了，請(qǐng)看下面小編幫你理順的吧：

精密度是指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間接近的程度。

精密度的表示方法

氣相色譜法和高效液相色譜法是對(duì)同一供試液進(jìn)行至少五次以上的測(cè)定;精密度一般用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (relative standard deviation, RSD) 表示： RSD= 標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均值 * 100 %

精密度報(bào)告的數(shù)據(jù)應(yīng)包括平均值、可信限及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

一般在一天之內(nèi)進(jìn)行的精密度考察稱為日內(nèi)精密度 (inter-day variability) ;在三天之內(nèi)進(jìn)行的精密度考察稱為日間精密度 (intra-day variability) 。

有時(shí)為了考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，還需設(shè)計(jì)進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)，變動(dòng)因素包括不同日期、不同分析人員和不同設(shè)備。

重復(fù)性： 主要目的是為了驗(yàn)證所選用的方法對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定時(shí)，檢測(cè)結(jié)果的精密程度(可以用3個(gè)不同濃度的溶液，每個(gè)濃度制備3份，或是用100%的濃度溶液不少于6個(gè)的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià))。

重現(xiàn)性： 主要目的是為了驗(yàn)證針對(duì)同一樣品檢測(cè)時(shí)，所選用的方法的精密程度(可用同一個(gè)樣品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià))。

簡(jiǎn)言之就是：

重復(fù)性：同一個(gè)人，同一臺(tái)儀器，在一定時(shí)間內(nèi)的樣品精密程度

重現(xiàn)性：不同實(shí)驗(yàn)室，或不同操作人員，或不同儀器上的精密程度。

網(wǎng)友疑問解答：

不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性。狹義來說，同一實(shí)驗(yàn)室，相同或不同的人，用不同的儀器做的結(jié)果也可以說是重現(xiàn)性。重現(xiàn)性差有很多原因。比如柱子性能的不同。就算是同一型號(hào)柱子也會(huì)有差別。還有和流動(dòng)相配制的溶劑、水有關(guān)。還有和儀器本身的性能，比如說死體積不同，不同廠家的檢測(cè)器的檢測(cè)限不同等多方面原因。還有可能是操作有關(guān)，比如外標(biāo)分析時(shí)用的自動(dòng)進(jìn)樣小瓶裝樣過多，導(dǎo)致進(jìn)樣量有偏差。

如果重復(fù)性差的話，要想好很多的可能性，挨個(gè)排除，主要和泵有關(guān)，還有就是進(jìn)樣量，還有就是系統(tǒng)沒有平衡好，還有可能是流動(dòng)相不均勻，沒過濾好，還可能是有氣泡，再就是柱效差，或是方法不合適導(dǎo)致的峰型不好，還有可能就是樣品檢測(cè)線性不好。排除以上可能就是你儀器的性能不好了。

問題：

1、我做液相色譜平行樣的時(shí)候，從來沒出現(xiàn)過兩次類似的情況，出峰位置基本都在誤差允許范圍，主要是峰面積相差巨大，而且都是第一次進(jìn)樣那時(shí)候峰面積最大，第二次就會(huì)明顯變小，然后后面幾次進(jìn)樣一直也都蠻小，而且互相之間也有蠻大的差距，這到底是什么原因?會(huì)是儀器自身不穩(wěn)定?進(jìn)樣瓶會(huì)不會(huì)對(duì)主成分存在吸附呢?有沒有可能是主成分穩(wěn)定性不好呢?

2、用得是5ml容量瓶，應(yīng)該不會(huì)吸附，測(cè)的是苯胺類化合物，半揮發(fā)性，可是再換一種流動(dòng)相的時(shí)候，第一次進(jìn)樣峰面積并不小，再進(jìn)樣峰面積變小，然后再換一個(gè)流動(dòng)相,第一次進(jìn)樣峰面積又不會(huì)變小，怎么回事?

建議：

其他條件都一樣的話，應(yīng)該是樣品的量在溶解，或者流動(dòng)相隨著時(shí)間在變化，試試將樣品衍生化再進(jìn)樣。應(yīng)該是你的主成分揮發(fā)或是分解的原因。如果流動(dòng)相放的時(shí)間太長致使組成輕微變化，或者機(jī)器工作時(shí)間長升溫了，都會(huì)使RT變化的，想想你的過程，有沒有這方面的原因。

三次進(jìn)樣明顯有吸收值變化的問題，但是出峰時(shí)間相差不大，這個(gè)也可能是因?yàn)槟愕臉悠冯S著時(shí)間的變化發(fā)生的三者間的轉(zhuǎn)化或樣品的揮發(fā)。

另外要考慮樣品是不是現(xiàn)配現(xiàn)做的，還是配了一個(gè)樣品連續(xù)做三次，剩下的放在冰箱里，如果是這樣的話有可能是濃度變小了。可以用另外一臺(tái)儀器試下，如果重現(xiàn)性好的話，可排除這種狀況。

編者話：

關(guān)于色譜儀器，可以說是所有從事實(shí)驗(yàn)室的分析人員們接觸最多也是最熟悉的儀器類別，但是各種各樣的問題還是會(huì)定期的接踵而至，你總會(huì)發(fā)現(xiàn)：還是有些這樣那樣的問題是你所搞不定的，所以如果你有什么工作中的疑惑，或是你想在微信公眾賬號(hào)中有想了解到的知識(shí)，請(qǐng)告訴我們，小編會(huì)盡自己所能，奉獻(xiàn)自己的時(shí)間為您整理!

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